XXXVII
Congreso de la Sociedad Española de Inmunología Clínica y Alergología Pediátrica
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1.1. Factores dependientes dela técnica y
el aparato
Existendistintos aparatos comerciales dispo-
nibles: ECoScreen®, EcoScreen-2 (23), EcoS-
creen turbo(Cardinal Health, Hoechberg,
Germany); Anacon (Biostec,Valencia, Spain);
RTube (RespiratoryResearch, Charlottesville,
VA,USA) ;Turbo-Decs® (ItalChillPharma and
IncofarSrl, Modena, Italy). Existen también
distintos grupos que han publicado estudios
en los que se utilizan aparatos caseros que
consiguen el mismo objetivo
(3,20)
. Los resul-
tados obtenidos difieren en función del apa-
rato utilizado
(22)
. Debido a las distintas carac-
terísticas físico-químicas de los mediadores
en CAE que podemos estudiar no existe un
aparato ideal y deberemos elegirlo en fun-
ción del biomarcador de interés.
Los distintos aparatos poseen distintos re-
vestimientos que influirán en los resultados
del análisis. No se obtienen los mismos re-
sultados si se han utilizado revestimiento
de cristal siliconado, PET,Teflón®, cristal, o
aluminio por lo que siempre debemos re-
gistrar el aparato utilizado.
Para conseguir el condensado del exhalado
debemos hacer pasar el aire por un circui-
to refrigerado para lo que podemos utilizar
distintos condensadores que produzcan
una temperatura de 4ºC o inferiores. Se
pueden utilizar varios métodos como el
uso de hielo húmedo, hielo húmedo con
sal, hielo seco, nitrógeno líquido o siste-
mas eléctricos de refrigeración. Depen-
diendo de la temperatura que tengamos
obtendremos muestra que variará entre el
líquido y el sólido. Esta distinta tempera-
tura afectará a los distintos biomarcadores
de forma distinta. Las condiciones ambien-
tales (temperatura, humedad) así como los
niveles de moléculas presentes en el aire
ambiental también podrán influir, bien di-
rectamente sobre la muestra (reaccionan-
do con componentes presentes en el CAE)
o bien inducir cambios bioquímicos en las
vías aéreas. Las muestras recogidas no se
deben dejar a temperatura ambiental para
evitar potenciales cambios en los biomar-
cadores a analizar, igualmente se reco-
mienda registrar las condiciones ambien-
tales en las que se realiza la recogida.
1.2. Factores dependientes de la muestra
Existen otros factores que son directamen-
te dependientes de la muestra recogida. El
principal a tener en cuenta es el grado de
dilución (y concentración de la muestra).
Dado que el mayor porcentaje del aire ex-
halado es vapor de agua, los biomarcado-
res a analizar están siempre en pequeña
concentración e incluso a veces en el lími-
te de detección. El grado de dilución de la
muestra puede variar incluso dentro del
mismo sujeto debido a que la liberación de
solutos del vapor de agua exhalado es im-
predecible y variable. Para poder comparar
resultados entre pacientes es necesario por
tanto tener en cuenta el factor de dilución
de la muestra. Se puede utilizar la medición
de cualquier sustancia cuya concentración
en muestras de CAE se corresponda con la
concentración en suero (urea, concentra-
ción de cationes…). Otra forma más sencilla
es medir la conductividad de la muestra.
Otro factor importante que influirá en la
muestra son los patrones respiratorios.
Un aumento del volumen corriente o de la
ventilación/minuto aumenta el volumen re-
cogido sin disminuir la conductividad (no
altera el grado de dilución). En función de
donde se origine el biomarcador a estudiar
estará más o menos influido por los patro-
nes respiratorios: los originados en los al-
veolos son menos dependientes mientras
que los originados en la vía aérea si son
dependientes. Las recomendaciones son
realizar la recogida a volumen corriente y
recoger la frecuencia respiratoria, el volu-
men total exhalado y el tiempo de recogi-
da. Respecto al tiempo de recogida se ha
comprobado que está directamente rela-
cionado con el volumen recogido y de for-
ma indirecta con la pCO
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de la muestra; no
modifica los niveles de otros parámetros
como el pH, la concentración de nitratos/
nitritos, o de 8-isoprostano. Una recogida
estándar de 10 minutos suele ser suficiente
para recoger 1-2 ml de CAE.
