SEICAP ÁVILA 2013 - page 311

XXXVII
Congreso de la Sociedad Española de Inmunología Clínica y Alergología Pediátrica
311
Los mediadores a estudiar son muy varia-
bles. Se puede realizar el análisis aislado de
una o pocas dianas metabólicas, el análisis
de todo un perfil metabólico estudiando va-
rios componentes de una ruta metabólica
determinada o realizar complejos estudios
de metabolómica que nos dan un perfil ge-
neral de todos los componentes metabóli-
cos de la muestra. Los biomarcadores que
más se han utilizado han sido el pH, el H
2
O
2
,
los derivados del ácido araquidónico, deri-
vados del ATP y los productos relacionados
con el metabolismo del óxido nítrico.
En función del biomarcador a estudiar uti-
lizaremos distintas técnicas de análisis.
En algunos casos podemos utilizar para
el mismo biomarcador distintas técnicas y
esto será importante tenerlo en cuenta a la
hora de interpretar los resultados y sobre
todo a la hora de comparar resultados en-
tre distintos estudios. Las principales téc-
nicas utilizadas son la ph-metría, el RIA, el
EIA, la técnica de ELISA, la cromatografía y
de forma más avanzada la espectrometría
de masas y la RMN.
2. Análisis del CAE:
2.1. pH
Es el parámetro mejor estandarizado y más
reproducible y cuya técnica de medición es
más sencilla (pH-metría). Los niveles de pH
se ha relacionado directamente con la in-
flamación (a mayor acidez mayor inflama-
ción). Existen varios estudios en población
pediátrica en los que se observan niveles
más bajos en pacientes asmáticos que en
población sana y aunque no se ha compro-
bado en todos los estudios, niveles más
bajos se suelen corresponder con peor
control
(21)
. A pesar de eso en algún estudio
no se ha observado esta diferencia, tal vez
está en relación con la técnica utilizada.
2.2. Productos relacionados con el
metabolismo del Óxido Nítrico
El estudio del óxido nítrico del aire exhala-
do es uno de los mediadores más estudia-
dos. En el CAE se han estudiado algunos
de sus metabolitos como los nitratos/nitri-
tos. El método principal para su análisis es
la fluorometría (reacción de Greiss). En 2
estudios se han detectado niveles signifi-
cativamente más elevados de nitritos en
pacientes asmáticos, aunque estos datos
no se han confirmado en otros estudios.
Los niveles de nitratos/nitritos no se rela-
cionan con los niveles de FeNO
(21)
.
2.3. H
2
O
2
Molécula inestable que se debe analizar in-
mediatamente tras su recogida o congelar
hasta su análisis. En general se utilizan téc-
nicas de espectrometría o fluorometría. Al-
gunos de los estudios realizados en niños
muestran niveles elevados en población
asmática, aunque esto no se confirma en
todos los estudios pediátricos
(21)
.
2.4. Derivados del ácido araquidónico
Para el estudio de 8-isoprostanos se suelen
utilizar técnicas de ELISA, RIA y en ocasio-
nes técnicas más específicas como la es-
Tabla 5:Tiempo de almacenamiento recomendado en muestras de CAE
Mediador estudiado
Tiempo máximo recomendado
pH
2 años
H2O2
40 días
Citocinas
1 año
Nitratos/nitritos
2-3 meses
!
1...,301,302,303,304,305,306,307,308,309,310 312,313,314,315,316,317,318,319,320,321,...466
Powered by FlippingBook